Анализы на хеликобактер пилори

Учитывая массивную пораженность населения хеликобактерией, ее роль в патогенезе заболеваний желудка с последующим переходом в раковую опухоль, очень важно проверить людей из групп риска на наличие хеликобактер пилори. Это же касается пациентов с уже диагностированным заболеванием. У них определение хеликобактер дает возможность узнать причину болезни, провести специфическое лечение и проконтролировать его результативность.

Как обнаружить инфекционный возбудитель, который:

• не растет на обычных питательных средах;
• местом обитания «выбрал» желудочный сок с достаточной кислотностью;
• прекрасно передвигается в гелеобразной слизи благодаря своим жгутикам и спиралевидной форме;
• при опасной для себя ситуации покрывается защитной пленкой и принимает шаровидную форму.

Оказалось, эта задача разрешима. Особенностью большинства видов анализов на хеликобактер является выявление не самого возбудителя, а типичных изменений в организме, которые он вызывает.

Какие виды исследования на хеликобактер пилори проводятся для диагностики?

На сегодня существует несколько способов как выявить хеликобактер пилори в организме человека. Оптимальный метод подскажет лечащий врач. Выбор зависит от возможностей лаборатории, состояния пациента, возраста, цели исследования.

Обычно назначают:

• анализ крови на определение наличия антител, иммуноглобулинов к хеликобактер пилори, выделение специфической ДНК микроорганизмов, исследование с высокой точностью показывает реакцию образования антител на чужеродный агент и присутствие его генных структур;
• наличие генетического материала можно обнаружить по анализу кала на антиген бактерии;
• дыхательный тест позволяет выявить уреазную активность возбудителя в желудке, этот фермент (уреазу) — один из выделяемых хеликобактерией;
• самым точным считается цитологический вид исследования материала из слизистой оболочки желудка, извлеченного при фиброгастродуоденоскопии, потому что он является единственным, который подтверждается видом самой бактерии под микроскопом.

Рассмотрим преимущества и недостатки каждого способа исследования.

Наиболее точный анализ получают, назначая по 2 и более разных видов диагностики различными методиками

Подтверждение наличия хеликобактерии по анализу крови

Выявить такую бактерию как хеликобактер пилори в крови невозможно, потому что она туда не попадает. Место обитания ограничивается желудком, кишечником, заносом в ротовую полость, в слюну. Специфическая иммунная реакция образуется в ответ на внедрение патогенного микроба. В крови появляются антитела и иммуноглобулины.

Антитела выявляют методом иммуноферментного анализа (ИФА) по титрам. Еще более достоверным результатом является определение количества иммуноглобулинов, принимающих участие в формировании иммунитета.

Для исследования берут венозную кровь. Специальным веществом осаждают клеточные элементы и получают плазму. Небольшое количество разносится по ячейкам планшета, в которые предварительно внесены стандартные антигены.

Если в крови человека имеются антитела, то на дне ячеек происходит не видимая глазу реакция

Исход подтверждается внесением краски и разной интенсивностью окрашивания лунок. Количественно учесть результат можно с помощью спектрофотометрического способа. Заключение выдается в цифровом значении. Нормы антител к хеликобактер пилори в титрах выражаются в единицах измерения и определены к каждому типу иммуноглобулинов.

Недостаток метода заключается в возможностях и законах срабатывания иммунной системы. Следует помнить, что:

• антитела появляются не сразу, им необходим некоторый срок для образования (для иммуноглобулинов типа М — почти месяц);
• реакция также означает встречу ранее с патогенным микроорганизмом, перенесенную болезнь, после чего длительно остаются антитела (у пожилых людей пожизненно);
• нарушение иммунитета у пациента отражается на достоверности результатов анализа.

Метод дает ложноположительные и ложноотрицательные ответы. Единственная возможность повышения диагностического значения анализа на хеликобактер пилори — изучение каждого типа иммуноглобулинов в отдельности и вместе.

Расшифровка результатов анализа крови

Особенностью состава иммуноглобулинов являются:

• IgG — самый распространенный тип, на него приходится до 75% всего состава иммуноглобулинов, вырабатывается спустя 3–4 недели после «встречи» с антигеном, сохраняется от месяца до полутора лет после эффективного лечения, у некоторых людей пожизненно;
• IgA и IgМ — наиболее крупные белковые комплексы, но на них приходится только 10% всех типов, вырабатываются быстро, IgA к хеликобактер пилори можно также выявить в слюне пациента, содержимом желудка;
• тип А показывает насколько высока активность воспалительной реакции.

Способ полимеразной цепной реакции

Метод нуждается в дорогостоящем оборудовании, поэтому используется не во всех медицинских учреждениях. Суть — не просто выявление антител и иммуноглобулинов, а ДНК самой бактерии (вещества, определяющего генетическую структуру). Способ настолько точен, что позволяет выявить единственную бактерию.

Анализ основан на многократном удвоении нужного фрагмента ДНК (до 30–40 копий) по заданным параметрам. Цепочка копирования создает достаточное количество материала для исследования. Чаще используется при диагностических сложностях, разногласиях в трактовке результатов.

Выводы:

• диагностика хеликобактер пилори по анализу крови должна проводиться с учетом предполагаемой задачи (выявить наличие продуктов воздействия бактерии, установить активность воспалительного процесса, бактерионосительство, подтвердить излечение после курса терапии);
• тип иммуноглобулинов указывает на раннюю защитную реакцию, последствия перенесенного воспаления;
• следует учитывать возможность ложных и сомнительных результатов;
• для получения более точных данных необходима комплексная оценка всех анализов.

Как обнаруживается хеликобактер пилори в каловых массах?

Брать для анализа каловые массы — удобный вариант обследования пациентов детского возраста, пожилых людей. Способ не нуждается в присутствии самого больного. Следует учитывать особенности существования хеликобактерий в кале. Среда кишечника:

• не имеет необходимой кислотности;
• обеднена кислородом;
• подвержена воздействию сильных ферментных систем желчи и сока поджелудочной железы.

В количественном отношении число бактерий в кишечнике значительно снижается

Для выявления признаков, указывающих на бактерию хеликобактер, наиболее пригоден метод полимеразной цепной реакции. Суть уже описана выше. Создание цепи из копий позволяет увеличить число определяемых участков ДНК и зафиксировать участие возбудителя в причине заболевания пациента с точностью до 95%.

Материалом для исследования могут быть кроме крови и кала:

• слюна;
• моча;
• откашливаемая мокрота;
• у беременных околоплодные воды.

После курса специального антибактериального лечения метод длительно будет давать положительные результаты в связи с отхождением разрушенных частиц микроорганизмов.

Уреазный дыхательный тест

Анализ на хеликобактер пилори методом уреазного теста связан с синтезом бактерией фермента уреазы. Именно она дает возможность микроорганизму существовать в желудочном соке, расщепляет мочевину до уровня аммиака и углекислого газа, который выдыхается через легкие. Методика имеет 3 модификации:

• с мочевиной, меченной изотопами радиоактивного углерода;
• 13С – уреазный тест;
• хелик-тест.

Современные тест-системы оснащены специальной защитой дыхательной трубки от слюны

Вариант с изотопами мочевины — вначале исследования пациент просто дышит в трубку, у него берут две воздушные пробы. Спустя 15 минут после приема внутрь раствора меченой мочевины забираются еще 4 пробы. При дыхании важно своевременно сглатывать накопившуюся слюну, при попадании в пробы она портит результаты и тест приходится повторять.

Уреазный тест 13С — наиболее распространен в гастроэнтерологической диагностике. В данном варианте используют нерадиоактивную мочевину, меченую изотопом 13С. Пациенту приходится сдать только 2 пробы выдыхаемого воздуха в специальные пакеты: первую натощак утром, вторую — через 30 минут после приема диагностического раствора.

Преимуществами способа являются:

• точная диагностика;
• безопасность при отсутствии использования радиоактивных материалов;
• длительность исследования в пределах 40 минут, что удобно для пациента.

Дыхательный хелик-тест — в модификации применяется карбамид. Отличается большим поступлением выделенного газа после приема карбамидной смеси. Сравнивается содержание в начальной пробе воздуха и после воздействия карбамида.

Тест считается безопасным, предлагается для использования в диагностике детям и беременным женщинам. Но специалисты не подтверждают его достаточную точность, поэтому используют редко. В заключении после проведения уреазного теста будет указана активность:

• если обнаружена — положительный результат;
• если нет — отрицательный.

Количественно показатели определяют специальным аппаратом (масс-спектрометром). Принято давать оценку анализа на хеликобактер в зависимости от уровня изотопа или его заменителя в выдыхаемой воздушной смеси:

• легкой степенью обсеменения считается 1–3,4%;
• средней — 3,5–6,4;
• тяжелой — 6,5–9,4;
• крайне тяжелой — любые показатели свыше 9,5%.

Важно помнить, что уреазный дыхательный тест способен выдать ложноотрицательный результат, если накануне пациент принимал препараты, понижающие секреторную деятельность желез желудка. Эти медикаменты блокируют действие уреазы бактерии, тогда мочевина перестает расщепляться.

Как проводится уреазный экспресс-тест?

Определить хеликобактер можно по активности уреазы не только в выдыхаемом воздухе, но и непосредственно в полученном при фиброгастроскопии кусочке ткани из слизистой желудка. Его засевают на специальную среду, которая в случае наличия уреазы и выделения аммиака начинает ощелачиваться. Применение желтого индикатора сопровождается заменой на малиновую окраску.

Оценка проводится по количеству плюсов (+) в зависимости от времени, необходимого для смены цвета:

• + — потребовалось не меньше 24 часов (инфицирование незначительное);
• ++ — процесс занял до трех часов (распространенность умеренная);
• +++ — цвет изменился за час (инфицирование значительное).

Метод биопсии с цитологическим исследованием

Наиболее точным способом обнаружения является исследование цитологического материала в виде мазков слизи, полученного при фиброгастродуоденоскопии. Практически исключена возможность ложных результатов. Сложности зависят только от подготовки и опыта персонала.

Хеликобактерия под микроскопом имеет очень характерный внешний вид со жгутиками

Для количественной оценки используют обозначение обсемененности плюсами или число микроорганизмов в поле зрения:

• (+) или слабая — отмечается при выявлении до 20 бактерий в поле зрения микроскопа;
• (++) или умеренная — 20–40 микроорганизмов;
• (+++) высокая — свыше 40 бактерий.

Нужна ли подготовка перед сдачей анализа?

Где можно сдать анализ на хеликобактер подскажет врач при направлении пациента. Существующие методы часто требуют участия специальной технической базы и подготовки специалистов, которых нет в поликлинической сети. Поэтому приходится пользоваться услугами частных клиник. Важно соблюдать правила как сдавать анализ на хеликобактер пилори. Возможны особенности при различных методиках.

Способы выявления антител, иммуноглобулинов требуют:

• исключения из рациона за 24 часа до сдачи крови жирной пищи, алкоголя;
• прекращения приема лекарственных средств (антибиотиков, нестероидных противовоспалительных препаратов, гормонов) за 14 дней;
• ограничения физической работы;
• забора крови натощак.

При сдаче кала следует учесть:

• наличие других примесей при заболеваниях кишечника (слизь, гной, кровь);
• непригодным считается материал, содержащий мочу;
• не проводить лечение антибиотиками и Метронидазолом до получения результатов;
• запрещение слабительных средств в таблетках, растворе или ректальных свечах;
• за три дня исключить из питания пищевую клетчатку, соленые продукты.

Если назначен анализ на дыхательную уреазу любым методом необходимо:

• вечером легко поужинать и не есть до сдачи анализа;
• за час запрещается пить воду;
• в предыдущие 2 дня соблюдать диету с исключением черного хлеба, бобовых, капусты, яблок (вызывают повышенное кишечное газообразование);
• нельзя принимать любой алкоголь, поскольку даже легкие пары спиртного в воздухе искажают результаты теста;
• для сокращения выделения слюны требуется отказ от курения;
• не рекомендуется пользоваться ополаскивателями и освежителями полости рта, достаточно почистить зубы обычной пастой;
• за 2 недели прекращается прием препаратов, снижающих кислотность желудочного сока;
• антибактериальные средства и нестероидные препараты следует отменить за неделю.

Для снижения образования слюны придется на время отказаться от жевательной резинки

Кому необходимо пройти обследование?

Анализ на выявление хеликобактерии в организме назначается по следующим показаниям:

• если человек часто ощущает дискомфорт в кишечнике в виде непонятных болей, повышенного газообразования, бурчания, склонности к поносам или запору, непереносимости какой-то пищи;
• на фоне полного здоровья, но при наличии больного человека в семье для выявления бактерионосительства, даже минимальное число бактерий в условиях сниженного иммунитета способно вызвать очень быстро тяжелое поражение желудка;
• нельзя оставлять без внимания такой признак, как быстрое опьянение от незначительных доз алкоголя с выраженным похмельем, хеликобактерии нарушают процессы переработки пищи, действие ферментов по усвоению спирта;
• при непонятных болях в области эпигастрия, чувстве тяжести, изжоге;
• ухудшение самочувствия после приема жирной и жареной пищи, острых блюд;
• у пациента появляются приступы тошноты и рвоты.

Количественное подтверждение обсеменения желудка хеликобактерией необходимо:

• для выбора методики лечения гастрита, язвенной болезни;
• выявления заражения в послеоперационном периоде пациентов с удаленной опухолью желудка, лимфомой;
• контроля эффективности целевого применения лекарственных средств.

С даты открытия хеликобактерии прошло уже более 140 лет. Современные ученые работают над предложениями по достоверным экспресс-тестам. Жизнь требует внедрения быстрого метода обследования на уровне поликлиники.